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液相色谱仪5个常见故障断定及解决方法

发布时间:2021-12-27      点击次数:414
   液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如,纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。
 
  液相色谱仪5个常见故障断定及解决方法:
 
  (一)保留时间变化
  1.柱温变化:柱恒温,必要时需配置恒温箱
  2.等度与梯度间未能充分平衡:至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
  3.缓冲液容量不够:用》25mmol/L的缓冲液
  4.柱污染:每天冲洗柱
  5.柱内条件变化:稳定进样条件,调节流动相
  6.柱快达到寿命:采用保护柱
 
  (二)保留时间缩短
  1.流速增加:检查泵,重新设定流速
  2.样品超载:降低样品量
  3.键合相流失:流动相pH值保持在3~7.5检查柱的方向
  4.流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀
  5.温度增加:柱恒温
 
  (三)保留时间延长
  1.流速下降:管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡
  2.硅胶柱上活性点变化:用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱
  3.键合相流失:同前(二)3
  4.流动相组成变化:同前(二)4
  5.温度降低:同前(二)5
 
  (四)出现肩峰或分
  1.样品体积过大:用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%
  2.样品溶剂过强:采用较弱的样品溶剂
  3.柱塌陷或形成短路通道:更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
  4.柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
  5.进样器损坏:更换进样器转子
 
  (五)鬼峰
  1.进样阀残余峰:每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗
  2.样品中未知物:处理样品
  3.柱未平衡:重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)
  4.(TFA)氧化(肽谱):每天新配,用抗氧化剂
  5.水污染(反相):通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水
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